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Spark酶標儀加速新型抗菌藥物的研發進程

文章來源:發布時間:2018-01-15 15:19:09瀏覽數量:

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應對抗生素耐藥性的新型抗菌藥物的探索和開發,需要深入了解細菌響應和適應新化合物的方式。為測定潛在藥物的效能,需要進行一系列的測試,如聚集和粘附
/侵入檢測。在法國貝桑松的生物科技企業SMALTIS內部,測試自動化大幅提高了通量和數據采集速度,讓研究人員能夠騰出更多時間開發新實驗。
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SMALTISSophie GuénardCédric Muller博士于2014年創立,是一家專營微生物學、分子學和細胞生物學服務的CRO(外包研究機構)。其面向各種公私研究實驗室,提供定制細菌菌株、評估抗菌化合物活性、分析微生物樣本等服務,協助客戶完成各種研發項目。公司源于共同的研究背景,正如Cédric所言:“Sophie和我曾在Patrick Plésiat實驗室研究微生物學,希望探索囊腫性纖維化的首要致死因素綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)表現出的抗生素耐受性原理。我們有幸與一家大型藥企一同開發某種抗體疫苗;通過該項目,我們有了創辦一家企業來專門幫助實驗室加速微生物學研發的念頭。我們可以進行最小抑菌濃度(MIC)研究和殺菌時間曲線實驗,鑒定測試化合物和靶標細菌的作用機制,以及細菌適應藥物的方式,從而幫助客戶提高化合藥物效能。”

 

聚集和粘附/侵入檢測是SMALTIS提供的眾多服務中的一種。為了感染宿主,細菌通過纖毛(發卡狀結構)粘附到宿主細胞上,并與特定的細菌細胞受體相互作用。聚集檢測實驗可通過化合物與造成聚集的纖毛間的相互作用,評估化合物抑制粘附的能力。Cédric稱:“我們的基礎檢測通過拍攝持續五小時的常規圖像,檢測藥物-細菌間的相互作用。最初進行聚集檢測時,客戶為我們制定了專用于高內涵成像平臺的具體操作流程。由于這類系統較為昂貴,我們轉而尋求替代方法,開發了手動設置方法:首先在旋轉培養箱上孵育平板,然后每小時取下平板進行分析,之后再將平板放入培養箱。這種方法雖然有效,但非常耗費人力。”

 

“之后與Jean-Minjoz醫院的一家研究實驗室合作時,我們接觸到了Spark®多功能酶標儀。我們在該醫院的儀器上開發了聚集檢測實驗方案,Tecan團隊的一組成員幫助我們進行了部分驗證實驗,證明我們的技術和方法可以應用到他們的系統上。之后我們又單獨購買了Spark酶標儀,從而以遠超高內涵平臺的性價比進行同類聚集檢測。”

 

Cédric補充道:“我們目前的實驗運行無需監控,還可交由Spark繪制實驗全程的菌株生長曲線。自動化讓我們能夠騰出更多時間開發其它實驗。

 

“之前需要一個人花費三天時間,現在只需一個半鐘頭。”

 

“我們還采用Spark進行粘附/侵入檢測,測定細菌菌株粘附或侵入真核細胞的能力。首先用細菌菌株接種細胞,進行一系列洗滌后,采用DAPI染色真核細胞,并讓含有特定抗體的細菌與AlexaFluor®染料結合。我們分別測定真核細胞和細菌發出的藍色和綠色熒光,從而判定菌株粘附/侵入能力的比例。在購買Spark之前,必須拍攝四到六張圖像以覆蓋每個96孔板,然后采用顯微鏡分析顏色。如今這些工作自動化完成,之前需要一個人花費三天時間,現在只需一個半鐘頭即可完成。Spark的使用體驗非常好;其可以輕松適應各種實驗安排,同時其高通量和自動化能力也可幫助我們不斷改善為客戶提供的服務內容。”Cédric總結道。

 

上述所有Tecan產品僅用于研究用途,不可用于臨床診斷。

 
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